Molecular detection of Anaplasma species in dogs in Colombia / Detecção molecular de espécies de Anaplasma em cães na Colômbia

Abstract Anaplasma platys and A. phagocytophilum are tick-borne pathogens that parasitize platelets and neutrophils, respectively, of humans and animals. The former is the etiological agent of canine cyclic thrombocytopenia, while the latter is that of canine granulocytic anaplasmosis. This work involved the detection and identification of Anaplasma species in blood samples from dogs in Colombia, using molecular techniques. Between December 2008 and April 2009, blood samples were drawn from the cephalic vein of 91 dogs in the central-western region of Colombia (cities of Bogota, Villavicencio and Bucaramanga) and stored in tubes containing EDTA. These samples were used in 16S rRNA-Anaplasma spp. nPCR and the preparation of blood smears. One (1.1%) of the 91 sampled dogs showed inclusions suggestive of Anaplasmataceae agents in the cytoplasm of platelets. Based on PCR followed by sequencing and phylogenetic analysis, A. platys and Anaplasma sp. closed related to A. phagocytophilum were detected in two and one dog, respectively. Interestingly, all the samples were negative for specific msp-2-A. phagocytophilum real-time qPCR, suggesting the circulation of an Anaplasma species phylogenetically related to A. phagocytophilum in dogs in the aforementioned region. Hence, Anaplasma spp. circulates among dogs in Colombia, albeit with low frequency. To the best of authors' knowledge, this is the first molecular detection of Anaplasma spp. in dogs in Colombia.

Resumo Anaplasma platys e A. phagocytophilum são patógenos transmitidos por carrapatos que parasitam plaquetas e neutrófilos, respectivamente, de humanos e animais. Enquanto o primeiro é agente etiológico da trombocitopenia cíclica canina, o último é o agente responsável pela anaplasmose granulocítica canina. O presente trabalho objetivou detectar e caracterizar, utiizando técnicas moleculares, a presença de espécies de Anaplasma em amostras de sague de cães na Colômbia. Entre Dezembro de 2008 e Abril de 2009, amostras de sangue colhidas em tubos contendo EDTA da veia cefálica de 91 cães da região centro-oeste da Colômbia (cidades de Bogotá, Villavicencio e Bucaramanga). As amostras de sangue foram utilizadas em reações de nPCR para 16S rRNA-Anaplasma spp. e confecção de esfregaços sanguíneos. Um (1,1%) dos 91 cães amostrados mostraram inclusões sugestivas de agentes Anaplasmataceae no citoplasma de plaquetas. Baseada na PCR seguida de sequenciamento e análise filogenética, A. platys and Anaplasma sp. relacionado a A. phagocytophilum foram detectados em dois e um cão, respectivamente. Interessantemente, todas as amostras mostraram-se negativas na PCR em tempo real quantitativa específica para msp-2-A. phagocytophilum, sugerindo a circulação de uma espécie de Anaplasma sp. filogeneticamente relacionado ao A. phagocytophilum em cães na região estudada. Embora em uma baixa freqüência, Anaplasma spp. circula entre cães na Colômbia. O presente trabalho representa a primeira detecção de Anaplasma spp. em cães na Colômbia.

Efeitos de diferentes doses de hiclato de doxiciclina nos parâmetros hematológicos de cães com erliquiose / Effects of different doses of doxycycline hyclate on haematological parameters of dogs with ehrlichiosis

Este estudo objetivou comparar os efeitos de duas doses de hiclato de doxiciclina sobre a contagem de hemácias, concentração de hemoglobina, hematócrito, contagem de leucócitos e plaquetas de cães com erliquiose. Foram estudados os grupos I, composto por cães saudáveis (n=6), negativos na sorologia para Ehrlichia canis e Leptospira spp., na PCR em tempo real para E. canis e Anaplasma platys e na semi–nested PCR para Babesia canis; grupos II (n=6) e III (n=6), compostos por cães com história clínica sugestiva, sorologia e/ou PCR em tempo real positivas para E. canis, e negativos na pesquisa de anticorpos anti-Leptospira spp., na PCR em tempo real para A. platys e na semi–nested PCR para B. canis. Os cães doentes foram tratados com hiclato de doxiciclina via oral a cada 12 horas por 30 dias (5 mg/kg, grupo II; 10 mg/kg, grupo III). Hemogramas foram feitos antes, decorridos 15 dias e aos 10 dias após o término dos tratamentos. Não houve diferenças entre os grupos nos tempos avaliados quanto às variáveis hemácias, hemoglobina, hematócrito e leucócitos. Observou-se diferença quanto aos trombócitos entre o grupo I e os grupos II e III (p<0,0001) no início do estudo. Aos 15 dias de tratamento, a média do grupo III foi menor que dos grupos I (p=0,008) e II (p=0,0007), indicando persistência da trombocitopenia, ausente no grupo II. Não houve diferença entre os grupos no tempo final, sugerindo que ambos os tratamentos promoveram aumento da contagem de plaquetas em cães naturalmente infectados por E. canis.

This study aimed to compare the effects of two doses of doxycycline hyclate on red blood cells, hemoglobin, hematocrit, white blood cells and platelets of dogs with ehrlichiosis. Group I, comprised of healthy dogs (n=6), negative on serology for Ehrlichia canis and Leptospira spp., real time PCR forE. canis and Anaplasma platys, and on semi–nested PCR for Babesia canis; Groups II (n=6) and III(n=6), comprised of dogs with suggestive clinical history, positive serology and/or real time PCR for E.canis, negative on research for anti-Leptospira spp. antibodies and real time PCR for A. platys, and on semi–nested PCR for B. canis were studied. Sick dogs were treated with doxycycline hyclate every 12hours, by mouth, for 30 days (5 mg/kg, group II; 10 mg/kg, group III). Complete blood counts were performed before, after 15 days, and 10 days after period of treatment was complete. No difference between groups at the studied time points were noticed for red blood cells, hemoglobin, haematocrit and white blood cells. Difference was observed for platelets between group I and groups II and III(p<0.0001) at the study on set. After 15 days of treatment, the mean platelet for group III was lower than groups I (p=0.008) and II (p=0.0007), indicative of persistent thrombocytopenia, already absentin group II. No difference between groups was noticed at final time point, which suggests that both treatments increased platelets in dogs naturally infected with E. canis.

A retrospective study of canine cutaneous food allergy at a Veterinary Teaching Hospital from Jaboticabal, São Paulo, Brazil / Estudo retrospectivo da dermatite trofoalérgica canina em um Hospital Veterinário de Jaboticabal, São Paulo, Brasil

Cutaneous food allergy is an adverse immunological response, triggered by antigenic dietary components that may escape the digestion process and are absorbed intact through the gastrointestinal mucosa. In Brazil, there are only a few reports on cutaneous food allergy and antigenicity of food components used in pet food production. Thus, the aim of this report was to assess and describe data from medical records of canine patients diagnosed with cutaneous food allergy at a Veterinary Teaching Hospital from Jaboticabal, SP, Brazil, in order to evaluate epidemiological and clinical aspects related to this skin problem. From 2007 to 2012, 29 dogs received the diagnosis of cutaneous food allergy after an eight-week hypoallergenic elimination trial. Among them, purebred dogs were more frequent, as well as females, and their mean age was 50.4 months old. Pruritus was reported in all cases, especially in interdigital areas. In order to establish the diagnosis, most patients received home-cooked elimination diet, based on potato and lamb in approximately 80% of the cases. Besides, it was highlighted the importance of the hypoallergenic elimination diet being rigorously followed by dogs' owners, aiming the adequate control of the clinical signs related to cutaneous food allergy.

A dermatite trofoalérgica é uma resposta imunológica adversa, desencadeada por componentes dietéticos antigênicos, que escapam do processo de digestão e são absorvidos intactos pela mucosa gastrointestinal. No Brasil, há poucos relatos acerca da dermatite trofoalérgica e da antigenicidade dos componentes utilizados na produção de alimentos para animais. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar e relatar dados de prontuários de pacientes caninos diagnosticados com dermatite trofoalérgica em um Hospital Veterinário de Jaboticabal, SP, Brasil, a fim de analisar os aspectos epidemiológicos e clínicos relacionados a este problema de pele. De 2007 a 2012, 29 cães receberam o diagnóstico de dermatite trofoalérgica após oito semanas de dieta de eliminação hipoalergênica. Dentre eles, destacam-se os cães de raça definida e as fêmeas como mais frequentes, com idade média de 50,4 meses. Prurido foi a queixa relatada em todos os casos, especialmente na região interdigital. Para fins diagnósticos, a maioria dos animais recebeu dieta caseira de eliminação, a base de batata e carneiro em aproximadamente 80% dos casos. Ademais, destaca-se a importância de que a dieta de eliminação hipoalergênica seja criteriosamente seguida pelo proprietário, a fim de controlar adequadamente os sinais clínicos da dermatite trofoalérgica.